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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
L W-3A(小鼠皮下結締組織細胞) 5×106cells/瓶×2聚酰胺粉(柱層析用)質量規(guī)格：柱層析用Polyamide

AAV-293(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R027大鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人羊膜細胞;WISH聚酰胺粉(柱層析用，200-400目)質量規(guī)格：柱層析用，200-400目Polyamide

CM-H111人成骨細胞*培養(yǎng)基100mL二亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC))質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.95%(GC)Dimethyl sulfoxide

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)n-Decyl alcohol

人腎上腺皮質細胞HACC琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC))質量規(guī)格：standard for GC,≥99.6%(GC)Diethyl succinate
Mo7e細胞，人巨細胞白血病細胞株 小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞 角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS五味子酚（標準品）schisanhenol  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2FMOC-3,5-二-L-酪氨酸FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH質量規(guī)格：>98%,BR

BT-474(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠表皮角化細胞*培養(yǎng)基100mL 人Burkkit瘤細胞;Daudi10-脫乙酰巴卡亭(標準品)10-Deacetylbaccatin III質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+10-脫乙酰巴卡亭10-Deacetylbaccatin III質量規(guī)格：>98%,BR

DDR2 Others Rat 大鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素B1(標準品)vitamin B1質量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品
EB病毒轉化的人B細胞;KMYF 人關節(jié)軟骨細胞*培養(yǎng)基 100mL25-去乙酰基利福噴汀質量規(guī)格：美國進口25-Desacetyl Rifapentin

上皮細胞生長添加物MEpiCGS利魯唑-13C,15N2質量規(guī)格：美國進口Riluzole-13C,15N2

MAP2K6 Others Human 人 MKK6 / MEK6 / MAP2K6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基利魯唑質量規(guī)格：美國進口N-Hydroxy Riluzole

人Butt瘤細胞;RAJI地拉羅司-d4質量規(guī)格：美國進口Deferasirox-d4

MFC細胞，胃癌細胞 綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞 恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]N-去乙基舒尼替尼質量規(guī)格：美國進口N-Desethyl Sunitinib
游離DNA提取試劑盒U266細胞，人骨髓瘤細胞 串珠鐮刀菌 人胚腎二倍體細胞;HEK-2尼羅替尼-d3Nilotinib-d3質量規(guī)格：美國進口

TE-11(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×27α-硫代螺內酯-d7 (主要的)7α-Thiomethyl Spironolactone-d7 (Major)質量規(guī)格：美國進口

HO-8910(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 人APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS17α-硫代螺內酯7α-Thiomethyl Spironolactone質量規(guī)格：美國進口

人微血管內皮細胞裂解物HDMECL7α-硫代螺內酯7α-Thio Spironolactone質量規(guī)格：美國進口

PRSS27 Others Human 人 PRSS27 / Pancreasin / Marapsin 人細胞裂解液 (陽性對照) 6β-羥基-7α-(硫代) 螺內酯6β-Hydroxy-7α-(thiomethyl) Spironolactone質量規(guī)格：美國進口
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。